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紫外分光光度儀常見使用問題分析(二)

更新時間:2019-04-09   點擊次數(shù):2372次
  紫外分光光度儀常見使用問題分析(二)
  故障:紫外分光光度儀沒有任何檢測信號輸出
  原因:沒有任何光束照射到樣品室內(nèi)。
  檢查:將波長設(shè)定為530nm,狹縫盡量開到寬檔位,在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無綠光斑影像。
  處置:檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位,雙光束儀器的切光電機是否轉(zhuǎn)動了(耳朵可以聽見電機轉(zhuǎn)動的聲音)。
  故障:長時間段的負值或滿屏大噪聲
  具體表現(xiàn):做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負值或滿屏大噪聲
  原因:濾光片飼服電機“失步”,造成檔位錯位,國產(chǎn)電機尤甚。
  檢查:重新開機有可能回復(fù),或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激)。
  處置:更換飼服電機;
  故障:吸光值信號上下擺動
  具體表現(xiàn):當(dāng)儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器。
  原因:開關(guān)觸點因長期氧化所致造成接觸不良。
  檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化。
  處置:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。
  故障:紫外分光光度儀噪聲較大
  具體原因:樣品室放入空白后做基線記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚。
  原因:比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正范圍。
  檢查:將波長設(shè)定為250nm,先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零,然后將空比色皿插入樣品道一側(cè),此時吸光值應(yīng)小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小。
  處置:更換比色皿;更換空白液
  紫外分光光度儀使用注意
  1.使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
  2.取吸收池時,手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
  3.供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
  4.測定時除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度大的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸收度大波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
  5.供試品應(yīng)取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應(yīng)取2份。平行操作,每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
  6.選用紫外分光光度儀的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
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